Во биолошкото истражување обично се користат полипептиди со долга низа.За пептиди со повеќе од 60 амино киселини во низата, генската експресија и SDS-PAGE генерално се користат за нивно добивање.Сепак, овој метод трае долго време и ефектот на одвојување на финалниот производ не е добар.
Предизвици и решенија за долга синтеза на пептиди
При синтезата на долгите пептиди секогаш се соочуваме со проблем, односно стеричното попречување на реакцијата на кондензација се зголемува со зголемувањето на низата во синтезата, а времето на реакција треба да се прилагоди за реакцијата да биде целосна.Меѓутоа, колку е подолго времето на реакција, толку повеќе несакани ефекти се создаваат и се формира дел од целниот пептид.Ваквите остатоци – дефицитарните пептидни синџири се клучните нечистотии кои се создаваат при долгата синтеза на пептиди.Затоа, во синтезата на долгиот пептид, клучниот проблем што мора да го надминеме е да ги истражиме висококвалитетните услови на реакција и методите на реакција, за да ја направиме реакцијата на кондензација на аминокиселина посеопфатна и пополна.Дополнително, намалете го времето на реакција, бидејќи колку е подолго времето на реакција, толку понеконтролираните несакани реакции, толку посложени се нуспроизводите.Затоа, следните три точки се сумирани:
Синтезата на микробранова печка може да се користи: За некои аминокиселини кои се среќаваат во процесот на синтеза, а кои не е лесно да се интегрираат, може да се користи микробранова синтеза.Овој метод има извонредни резултати и во голема мера го намалува времето на реакција и го намалува формирањето на два клучни нуспроизводи.
Може да се користи метод на синтеза на фрагменти: Кога некои пептиди е тешко да се синтетизираат со заеднички методи на синтеза и не е лесно да се прочистат, можеме да ја усвоиме целата кондензација на неколку амино киселини во одреден сегмент од пептидот во пептидниот синџир како целина.Овој метод може да реши и многу проблеми во синтезата.
Може да се користи синтеза на ацилхидразид: ацилхидразид синтеза на пептиди е метод на цврста фаза синтеза на N-терминалниот Cys пептид и C-терминалниот полипептид хидразид хемиска селективна реакција помеѓу формирањето на амидни врски за да се постигне метод на пептидско поврзување.Врз основа на положбата на Cys во пептидниот синџир, овој метод го дели целиот пептиден синџир на повеќе секвенци и соодветно ги синтетизира.Конечно, целниот пептид се добива преку реакција на кондензација во течна фаза.Овој метод не само што значително го намалува времето на синтеза на долгиот пептид, туку и значително ја зголемува чистотата на финалниот производ.
Долго пептидно прочистување
Особеноста на долгите пептиди неизбежно води до сложени компоненти на суровите пептиди.Затоа, исто така е предизвик да се прочистат долгите пептиди со HPLC.Амилоид серија на полипептид процес на прочистување, апсорбирајќи многу искуство и успешно се користи во прочистување на долг пептид.Со усвојување на нова опрема, мешање на повеќе системи за прочистување, повторено одвојување и други методи на искуство, стапката на успех на долгото прочистување на пептидите беше значително подобрена.
Време на објавување: април-18-2023 година