Како високопрецизен инструмент, HPLC лесно може да доведе до некои проблематични мали проблеми доколку не се ракува на правилен начин за време на употребата.Еден од најчестите проблеми е проблемот со компресија на колоната.Како брзо да отстраните дефект на неисправниот хроматограф.Системот HPLC главно се состои од шише со резервоар, пумпа, инјектор, колона, температурна комора на колона, детектор и систем за обработка на податоци.За целиот систем, столбовите, пумпите и детекторите се клучните компоненти и главните локации кои се склони кон проблеми.
Клучот за притисокот на колоната е областа на која треба големо внимание при користење на HPLC.Стабилноста на притисокот на колоната е тесно поврзана со формата на хроматографскиот врв, ефикасноста на колоната, ефикасноста на одвојување и времето на задржување.Стабилноста на притисокот на колоната не значи дека вредноста на притисокот е стабилна при стабилна вредност, туку дека опсегот на флуктуација на притисокот е помеѓу 345 kPa или 50 PSI (дозволувајќи користење на елуција на градиент кога притисокот на колоната е стабилен и полека се менува).Премногу висок или премногу низок притисок е проблем со притисокот на колоната.
Најмногу склони кон дефекти и решенија на HPLC
1, високиот притисок е најчестиот проблем во употребата на HPLC.Ова значи нагло зголемување на притисокот.Општо земено, постојат следниве причини: (1) Генерално, ова се должи на блокирање на каналот за проток.Во овој момент, треба да го испитаме на парче.а.Прво, отсечете го влезот на вакуумската пумпа.Во овој момент, цевката PEEK беше наполнета со течност, така што цевката PEEK беше помала од шишето со растворувач за да се види дали течноста капе по желба.Ако течноста не капе или капе бавно, главата на филтерот за растворувач е блокирана.Третман: Потопете половина час во 30% азотна киселина и исплакнете со ултра чиста вода.Ако течноста капе случајно, главата на филтерот за растворувач е нормална и се проверува;б.Отворете го вентилот Purge за да не помине мобилната фаза низ столбот, а ако притисокот не е значително намален, белата глава на филтерот е блокирана.Третман: Филтрираните бели глави беа отстранети и звучни со 10% изопропанол за половина час.Под претпоставка дека притисокот паѓа под 100 PSI, филтрираната бела глава е нормална и се проверува;в.Отстранете го излезниот крај на колоната, ако притисокот не се намали, колоната е блокирана.Третман: Ако се работи за блокада на пуферска сол, исплакнете 95% додека притисокот не биде нормален.Ако опструкцијата е предизвикана од некој повисоко зачуван материјал, треба да се користи посилен проток од сегашната мобилна фаза за брзање кон нормален притисок.Доколку долготрајниот притисок на чистење не се намали според горенаведениот метод, може да се смета дека влезот и излезот на столбот се поврзани со инструментот напротив, а столбот може да се исчисти со мобилната фаза.Во тоа време, ако притисокот на колоната сè уште не е намален, плочата на ситото за влез на колоната може да се замени само, но штом работата не е добра, лесно е да се доведе до намалување на ефектот на колоната, затоа обидете се да користите помалку.За тешки проблеми, може да се размисли за замена на колоната.
(2) Неправилно поставување на брзината на проток: точната стапка на проток може да се ресетира.
(3) Неправилен сооднос на проток: индексот на вискозност на различни пропорции на текови е различен, а соодветниот системски притисок на протокот со поголем вискозитет е исто така поголем.Ако е можно, растворувачите со помал вискозитет може да се заменат или повторно да се постават и подготват.
(4) Движење на нулта притисок на системот: прилагодете ја нулата на сензорот за ниво на течност.
2, притисокот е премногу низок (1) обично е предизвикан од истекување на системот.Што да направите: Најдете ја секоја врска, особено интерфејсот на двата краја на колоната и затегнете ја областа за истекување.Отстранете го столбот и затегнете го или обложете го тефлонскиот филм со соодветна сила.
(2) Гасот влегува во пумпата, но притисокот е обично нестабилен во овој момент, висок и низок.Уште посериозно, пумпата нема да може да ја апсорбира течноста.Начин на третман: отворете го вентилот за чистење и исчистете со брзина од 3~5 ml/min.Ако не, воздушните меури се аспирираат на издувниот вентил со помош на наменска цевка за игла.
(3) Нема одлив на мобилна фаза: проверете дали има мобилна фаза во шишето на резервоарот, дали мијалникот е потопен во мобилната фаза и дали пумпата работи.
(4) Референтниот вентил не е затворен: референтниот вентил се затвора по забавувањето.Обично се спушта на 0,1.~ 0,2mL/min по затворање на референтниот вентил.
Резиме:
Во овој труд се анализираат само вообичаените проблеми во течната хроматографија.Се разбира, во нашата практична примена, ќе наидеме на повеќе други проблеми.Во справувањето со грешките, треба да ги следиме следниве принципи: менуваме само еден фактор во исто време за да ја одредиме врската помеѓу хипотетичкиот фактор и проблемот;Општо земено, при замена на делови за отстранување на проблеми, треба да обрнеме внимание на враќање на демонтираните непроменети делови на своето место за да се спречи отпад;Формирањето добра навика за снимање е клучот за успехот во справувањето со грешките.Како заклучок, кога се користи HPLC, важно е да се обрне внимание на предтретманот на примерокот и правилното функционирање и одржување на опремата.
Време на објавување: 18-ти септември 2023 година